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WAKO的產品介紹

發布時間: 2024-12-03  點擊次數: 77次
CEPT是美國國立衛生研究院(NIH)開發的小分子混合物。由4種成分組成,并取其組成成分(Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB)的開頭字母命名為“CEPT"。


研究表明,CEPT可防止人ES/iPS細胞(人多能干細胞:hPSCs)在細胞傳代中的細胞應激和DNA損傷1)。與強效ROCK抑制劑Y-27632相似,可提高細胞傳代和凍存時hPSCs的存活率。

此外,與基于hPSCs的胚狀體和類器官形成、單細胞克隆和基因編輯等干細胞研究中所用的現有培養方法相比,CEPT還可改善細胞存活率1,2,3)

FUJIFILM Wako已上線經無菌測試且無需制備的即用型CEPT Cocktail溶液。本產品為經過濾器滅菌的溶液,可直接添加至培養基使用。有助于再生醫療研究。

參考文獻
1)Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021).
2)Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16, 3076 (2021).
3)Tristan, C.A. et al. : Nat.Protoc., 18, 48 (2022).

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◆特點
● 從DNA損傷等細胞應激中保護ES/iPS細胞,維持細胞結構與功能
● 已進行過濾滅菌的即用型混合溶液
● 已通過內毒素測試以及支原體陰性檢測的CultureSure系列

◆測試項目
● 濃度(HPLC):已通過測試
● 外觀:液體
● 內毒素:<3 EU/mL
● 已完成無菌測試
● 已完成支原體陰性測試

◆使用方法
以1/1,000的量添加本品至培養基,充分混合后使用。
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※使用注意
● 本產品為凍存品(-20°C)。為避免反復凍融,建議根據使用量分裝凍存。
● 溶解時可能會出現沉淀,并非產品質量問題,請直接使用。(沉淀于37°C下靜置1~2 h可能會溶解,請避免反復冷凍和加熱。
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◆適用范圍
樣品:人ES/iPS細胞
應用:
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◆性能數據
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®   hPSC Δ培養基,在37°C,5% CO2的條件下培養人iPS細胞201B7株(6孔板 1 well=9.5cm2)。

培養經過16 h以后,更換不含CEPT或Y-27632的培養基,每2~3天更換培養基,繼續培養。

培養第8天時,確認細胞后,使用4%多聚甲醛固定細胞,ALP染色后,計數細胞集落。
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單細胞克隆測試
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培養基,在37°C,5% CO2的條件下培養人iPS細胞201B7株(96孔板)。

培養經過16 h以后,更換不含CEPT或Y-27632的培養基,每2~3天更換培養基,繼續培養。

培養第13天時,確認細胞后,使用4%多聚甲醛固定細胞,ALP染色后,計數形成細胞集落的孔數與空孔數。

通過所有孔數與細胞集落形成孔數之比,計算細胞集落形成率。
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【結果】
細胞接種數少時,添加CEPT的組比添加Y-27632的組形成的細胞集落更多。

未分化人iPS細胞的維持確
【細胞株】人iPS細胞201B7株
【培養基】StemSure® hPSC培養基Δ+35 ng/mL bFGF
Red:rBC2LCN-635(人iPS細胞膜染色)
Blue:DAPI (細胞核染色)
※ BC2LCN是一種對存在與人ES/iPS細胞的膜表面的糖鏈具有高親和性的重組凝集素
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【結果】
添加CEPT時與添加Y-27632時都未觀察到細胞形態的差異,均可確認未分化維持狀態。

◆產品列表
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※ 僅供實驗研究用,不可用于臨床診斷。

 

 

 

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